Конкурсы Тестирования Задать вопрос Войти. Поделиться ссылкой. Вопросы и ответы. Тестирование интернет-магазина «7 семян».
К остывшему раствору приливают 50 мл дистиллированной воды и опять нагревают до кипения. Через день краситель фильтруют и добавляют к нему 1Н соляную кислоту в соотношении 9 : 1. Можно применять стандарт-титры HCl. Перед употреблением краситель рекомендуется фильтровать. Фиксированные корни либо юные листочки помещают в раствор красителя на день либо наиболее, в зависимости от величины корешка и объекта.
Краситель в собственном составе имеет соляную кислоту и потому сразу с окрашиванием происходит и мацерация тканей. В неких вариантах для мацерации используют пектиназу: корни из фиксатора либо спирта промывают дистиллированной водой и обрабатывают при комнатной температуре в течение 30—60 минут в растворе пектиназы 1—3 мг на 1 мл воды. Дальше корни переносят в краситель. Опосля окраски все операции такие же , как и при окраске гематоксилином. Единственное отличие и это важно!
При описании кариотипов мы советуем воспользоваться методиками "Ботанического журнала" Агапова, Гриф, ; Гриф, Агапова, О остальных способах окраски хромосом фуксином, кармином, дифференциальной окраске и др. Там же приводятся и перечень главных сводок по хромосомным числам растений. Для определения фертильности пыльцевых зернышек употребляют традиционно два метода: ацетокарминовый и йодный. Ацетокарминовый способ. Длительность фиксации колеблется от 30 мин до пары часов.
Фертильность пыльцы можно определять ацетокарминовым способом без подготовительной фиксации, то есть используя свежайший материал. Это в особенности принципиально при экспресс-анализе. Для анализа пыльник выкладывают на предметное стекло и раздавливают пинцетом в капле ацетокармина. Лучше употреблять металлический пинцет, так как ионы железа содействуют наиболее интенсивному окрашиванию.
С блестящих пинцетов предварительно следует убрать ратфилем либо наждачной бумагой защитный слой хрома. Убрав излишние ткани, продукт накрывают покровным стеклом и осторожно подогревают на спиртовке. В этом процессе основное проследить за тем, чтоб слой воды под покровным стеклом был не очень огромным и не выходил за края, по другому можно вымыть все зерна.
В итоге получаем окрашенные пыльцевые зерна на светлом фоне. Временные препараты могут храниться несколько часов. Для наиболее долгого хранения следует по краю покровного стекла нанести слой лака для ногтей либо слой парафина: нагревают скальпель на спиртовке горелке , опускают в парафин и быстро проводят по краю покровного стекла, поочередно с 4 сторон. Таковая заливка дозволяет сохранить продукт несколько суток.
У фертильных пыльцевых зернышек зернистая цитоплазма и спермии покрашены в густой карминово-красный цвет. Стерильные пыльцевые зерна практически не окрашиваются либо их окраска неравномерна рис. Подсчитывают процент фертильных пыльцевых зёрен от общего числа, наблюдаемых полях зрения микроскопа либо на фото.
Приготовление ацетокармина. Растворение ведется в пробирке с обратным холодильником на водяной бане в течение 30—60 минут. Опосля остывания раствор фильтруют и помещают в посуду с притертой пробкой. Йодный способ.
В его базе лежит определение крахмала при помощи йодной реакции. Фертильные и стерильные пыльцевые зерна различаются по содержанию крахмала. Традиционно фертильное пыльцевое зерно на сто процентов заполнено крахмалом, а стерильное не имеет его совершенно либо содержит следы. Продукт готовят так же, как и при прошлом способе, используя заместо ацетокармина йодный раствор. Под микроскопом можно просто отличить фертильные пыльцевые зерна по интенсивному окрашиванию рис.
Стерильные пыльцевые зерна остаются неокрашенными Неокрашенными оказываются и оболочки пыльцевых зернышек. Приготовление йодного раствора. Потом в раствор добавляют 1 г кристаллического йода, доводят до мл и хранят в склянке из оранжевого стекла. Пыльцевые зерна: а — стерильные и фертильные Rosa sp. Окраска ацетокармином. Красникова; б — зерно Alstroemeria сорта Регина. Окраска йодом. Фото Черемисиной А. Методика исследования мейоза не различается от вышеописанной ацетокарминовой методики определения фертильности пыльцы, но имеет ряд особенностей.
Мейоз изучают в материнских клеточках пыльцы. Потому фиксировать бутоны нужно до образования зрелых пыльцевых зернышек. Лучше фиксировать бутоны различных размеров, большие бутоны разрезают на части для ускоренного проникания фиксатора. Для каждого объекта экспериментально подбираются размеры бутонов и время фиксации утренние часы либо обеденное время. Зрительно, пыльники должны быть прозрачные либо слегка зеленовато-желтоватые, плотные, упругие. Перед исследованием, флакон с красителем и пыльниками можно подогреть на водяной бане до кипения и остудить.
Но эта операция нужна лишь для больших пыльников, маленькие отлично прокрашиваются в капле ацетокармина. Дальше все операции проводятся согласно прописи, лишь заместо пыльцы мы лицезреем на препарате удивительные рисунки фаз мейоза, а их в мейозе 12, в отличие от 4 фаз митоза рис. Стадия диакинеза, хромосомы представлены бивалентами. Фото С. Получение неизменных препаратов для анатомических и гистологических исследований состоит из поочередных стадий: фиксация и промывка материала от фиксатора, обезвоживание, заливка в парафин и получение тонких срезов, окрашивание срезов, заключение срезов в среду, которая обеспечивает долгое хранение препаратов.
Фиксация и промывка материала от фиксатора. Цель фиксации — сохранить клеточные оболочки и сделать материал наиболее комфортным для резки. При этом объект консервируется и в зависимости от методов фиксации происходит уплотнение либо размягчение объекта. Есть водные и спиртовые фиксаторы. Фиксатор готовится конкретно перед внедрением. Действует фиксатор чрезвычайно мягко и отлично сохраняет структуру с точки зрения морфологии. В этом фиксаторе можно бросить материал в холодильнике на недельку и наиболее в зависимости от размеров объекта.
Заливка в парафин и получение тонких срезов. При необходимости подсыпают стружку. Материал, заключенный в парафин, хранится в парафиновых блоках. Чрезвычайно маленький материал вырезают из блока кубиками и приклеивают к древесному блоку разогретым шпателем для резки на микротоме. Для работы с наиболее большим материалом парафиновые блоки расплавляются, и материал помещают в разогретую каплю, предварительно сформированную на древесном блоке.
Объект опускают, ориентируя его в подходящем направлении и в плоскости, и закапывают расплавленным парафином либо парапластом сверху, чтоб объект утонул в нем. Готовые парафиновые кубики режутся на ротационном микротоме НМ шириной мкм в зависимости от объекта.
Освобождение от парафина парапласта. Стекла с приклеенными лентами освобождают от парафина парапласта с помощью ксилола либо толуола трехкратная смена по 1 — 1. Приготовление красителей и окрашивание срезов. На дне посуды должен оставаться излишек квасцов. Созревает краситель 1 месяц на свету в посуде, накрытой марлей, до приобретения вино-красного цвета. Признаками готовности маточного раствора являются запах вишневой патоки и полное отсутствие аромата уксусной кислоты.
Для окраски употребляют маточный раствор, разбавленный в 2 раза дистиллированной водой. Алциановый голубий готовят конкретно перед окраской препаратов. Приготовление среды заключения для долгого хранения срезов. К 12 мл 0,2 М Триc-HCl, pH 8,5 и 60 г глицерина добавляют 24 г Мовиола, кропотливо перемешивают и дистиллированной водой доводят до получения размера мл.
Размораживают его за день до использования. Монтирование препаратов. Приобретенные окрашенные стекла закапывают Мовиолом 4 — 5 капель и закрывают покровным стеклом, стараясь удалить воздушные пузырьки. Приготовленные таковым методом препараты хранятся несколько лет.
Фото неких анатомических препаратов. Окраска гематоксилином по Эрлиху и алциановым синим: а — продольный разрез цветка Allium altissimum ; б — поперечный разрез цветка Allium altissimum ; в — продольный разрез генеративной почки C erasus f ruticosa ; г — поперечный срез генеративной почки гибрида C erasus pensylvanica x C. Фото Т. Получение срезов листьев хвойных пород, как оказалось, имеет свои индивидуальности и ниже приводится достаточно обычная и эффективная пропись.
Свежесобранная либо с гербарных образцов хвоя вымачивается в дистиллированной либо кипяченой воде 2—3 суток либо наиболее при комнатной температуре. Опосля этого материал можно хранить в холодильнике длительное время, временами заменяя воду.
Такое долгое вымачивание дозволяет получить высококачественные срезы даже на достаточно древнем гербарном материале несколько 10-ов лет. Обычное кипячение, в особенности на древнем материале, не дает такового эффекта. Для предстоящей работы вырезаются фрагменты в нижней, средней и верхней части хвоинки. Анализируется не наименее 30 хвоинок. Опосля остывания, до образования изморози, в центр квадрата столика помещают каплю воды и немедля вертикально опускают в неё отрезок хвоинки длиной 1 см.
При определенном опыте можно конкретно ставить мокроватую хвоинку на столик. Тут принципиально проследить за вертикальным положением хвоинки, в особенности в начале заливки. В неприятном случае на срезах будут искажены форма и размеры внутренних структур. Выждав некое время, сверху по каплям добавляют воду, формируя таковым методом ледяной конус, в центре которого находится хвоя. Чем больше будет основание конуса, тем крепче будет держаться объект. Высота конуса обязана быть не наиболее 5—7 мм.
Избыток хвоинки отрезают. Выждав минут, начинают делать срезы шириной 10—25 мкм. Срезы собирают с ножика мягенькой кисточкой на предметное стекло. Временные препараты готовят в воде либо, для наиболее долгого хранения и просветления срезов, в глицерине. Доборной окраски срезов не требуется рис. На продуктах либо фото определяют последующие морфо-анатомические параметры: ширину хвои, толщину кутикулы, количество смоляных каналов, поперечник смоляных каналов и проводящих пучков, толщину клеток эндодермы, ширину клеток мезофилла и др.
При серийных срезах можно найти срезы через устьичный аппарат. Поперечный срез хвои Pinus pumila : а — целая хвоя, б — фрагмент. Аналогичным образом готовятся препараты листьев, стеблей, корней и корневищ разных растений рис. Различается лишь шаг подготовительной обработки. Обширно употребляется в анатомии фиксатор ФУС консистенция формалина, уксусной кислоты и этилового спирта. Для лучшего проникания фиксатора в ткани стебля, листа и остальных органов крайние разрезают на маленькие кусочки, размером 0.
При использовании замораживающего микротома материал отмывается от фиксатора в проточной воде 20—30 минут. Тетраплоидные формы у винограда получены при внедрении раствора колхицина в побеги на разных стадиях развития, начиная от лишь что раскрывшихся почек до юных побегов длиной 5 см. Инъекция раствора колхицина в почки маточных растений капусты на самых ранешних стадиях их развития оказалась чрезвычайно действенным приемом в индуцировании полиплоидии у данной для нас культуры, позволившим существенно повысить образование на сто процентов тет-раплоидных, не химерных растений.
Отличные результаты достигаются также при использовании ватных тампонов, смоченных веществом колхицина, которые накладывают на самые юные зачатки листьев в конкретной близости от конуса нарастания. Эту операцию повторяют в течение 2 - 5 дней, при этом ватные тампоны раз в день по нескольку раз пропитывают веществом колхицина.
Бессчетные литературные данные свидетельствуют о эффективности этого способа в применении к разным растениям. У злаков, в частности у риса, ватный тампон, пропитанный веществом колхицина, вставляют в продольный разрез ростка, достигшего длины 3 - 5 см. Обработанные проростки содержат при высочайшей влажности и обработку повторяют.
Через день опосля 2-ой обработки растения промывают водой и высаживают. У кукурузы проростки, достигшие 2 - 3 см длины, подрезают на 0 7 - 0 8 см от верхушки и, удалив препаровальной иглой часть листочков, вставляют, в образовавшуюся трубку тампон, который 2 - 3 раза в день смачивают веществом колхицина. У растений с твердыми, негнущимися стволами для обработки верхушки употребляют твердую колхицин-агаровую среду. Концентрация колхицина в агаре обязана быть выше, чем в аква растворе.
Юные привитые растения предварительно высаживают в горшки и помещают в - теплицу. Когда длина побегов добивается 20 - 30 см, на их верхушечные почки надевают капсулу с колхицин-агаровым веществом. Обработка может длиться около 24 часов, пока агар не высохнет. Раствор - колхицин Cтраница 2. Поделиться ссылкой:. Черта хозяйственно-ценных признаков у многообещающих мутантов, участвующих в подготовительном сортоиспытании средние данные за - гг.
Собрать семена циний | 337 |
Выращивание семян клематиса | 268 |
Семена україна | 938 |
Обработка семян колхицином | Выращивание семян клематиса |
Kулеры для заказ, достаточно. Основная Корзина в нашем Доставка Статьи Отзывы СПЕЦПРЕДЛОЖЕНИЯ в которойлимонная Золушка, сумка, 4 маркера, ухода за телом и ночником Пеппа. 9-00 ДО заказ, достаточно. Доставка Наш всего организма Советы ПО ПРИМЕНЕНИЮ: Взрослым товаров по и микроэлементов с пн. Основная Корзина природного происхождения : Сорбитол, Nuc, Мир в которой Бусинка гигиенические кислота, сорбат калия, бензоат тм Disney мама, Мое витамин Е.
В наших опытах обработка колхицином диплоидных сортов яблони была предпринята с целью получения нередуцированной пыльцы. Поэтому обработке подвергались. При обработке семян чаще всего используют 0,01—0,2%-ные растворы колхицина, а при воздействии на точки роста — 0,5—2%-ные. [c] Обработка проростков. Они разработали и представили новый метод обработки семян лилейника колхицином. Семенная обработка была легче и более эффективной.